DNA探针法检测水牛乳及其制品中大肠杆菌O157:H7的研究

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以大肠杆菌O157:H7的志贺氏氏毒素Stx I基因保守序列设计特异性引物,并进行PCR扩增,采用地高辛标记扩增的DNA片段以制备探针。用DNA探针对纯菌种大肠杆菌O157:H7和对照组菌株进行斑点杂交检测,结果表明:大肠杆菌O157:H7的Stx I基因探针对纯菌种大肠杆菌O157:H7DNA产生较强的阳性反应,而与福氏志贺氏氏菌、枯草芽孢杆菌、单增李斯特氏菌、大肠埃希氏菌和伤寒沙门氏菌DNA等均无反应,表明该Stx I的DNA探针特异性较强。用该探针对人工污染水牛乳进行检测,成功检出大肠杆菌O157:H7,最低检出限为8.58×102 cfu/m L,可应用于水牛乳中大肠杆菌O157:H7的快速检测。
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