抗菌肽GK1在大肠杆菌中的融合表达

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为高效表达抗菌肽GKI并避免GKI的高抗菌活性对大肠杆菌宿主菌的致命影响,将经改造后的人胰岛素原(mhP1)与GK1的融合基因(mhP1-GK1)克隆到表达载体pET28a中,构建出表达质粒pET28a—mhPI-GKI,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。融合蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式表达,表达量占菌体总蛋白的20%。经CNBr裂解、阳离子交换层析和RP—HPLC纯化后,每升发酵液可获得5.7mg纯度大于97%的重组GKI。质谱检测显示重组GKI的分子量为2794.0D。抑菌活性实验表明纯化后
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