【摘 要】
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用α-苦瓜素(α-MMC)免疫小鼠(BALB/c),分离免疫脾细胞,采用聚乙二醇(PEG)法将免疫脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,筛选出分泌抗α-MMC素的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株
【机 构】
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四川大学纳米生物医学技术与膜生物学研究所,四川大学生命科学学院,四川大学生命科学学院/四川省动物疾病预防和食品安全重点实验室,
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用α-苦瓜素(α-MMC)免疫小鼠(BALB/c),分离免疫脾细胞,采用聚乙二醇(PEG)法将免疫脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,筛选出分泌抗α-MMC素的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株;采用小鼠体内诱生法制备腹水,Mabselect亲和层析纯化McAb,所得McAb经亚类鉴定为IgG2b亚类,通过间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和Western blot检测,所得McAb与α-MMC特异反应,与相同来源的MAP30无交叉反应,为深入研究α-MMC的结构与功能提供了检测手段。
Mice were immunized with α-malate (BALB / c), immunized splenocytes were isolated, and immunized spleen cells were fused with mouse myeloma cells (SP2 / 0) using polyethylene glycol (PEG) McAbs hybridoma cell lines secreting anti-α-MMC were screened. Ascites was induced by in vivo mouse in vivo, and McAbs were purified by Mabselect affinity chromatography. The obtained McAbs were subclassified as IgG2b subclasses, Indirect ELISA and Western blot analysis showed that McAb reacted specifically with α-MMC and did not cross-react with MAP30 from the same source, which provided a test method for further study on the structure and function of α-MMC.
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