变构蛇神经毒-小鼠腹腔巨噬细胞释放一氧化氮的影响

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变构蛇神经毒(modified dotoxified neurotoxin,MN81)是用氧化修饰法,氧化修饰眼镜蛇和银环蛇毒素得到的运动神经元病治疗药物。本文探讨MN81对小鼠腹腔巨噬细胞释放一氧化氮的影响,现将结果报告如下。1 材料与方法1.1 实验动物rn BALB/c小鼠,雄性,体重20±2 g购自军事医学科学院实验动物中心(动物许可证号:军医动字95012)。1.2 药品及试剂脂多糖(1ipopolysaccharide,LPS)(Sigma产品);RPMI 1640培养基(GIBCO产品);N-1-萘乙二胺盐酸盐(分析纯)、磺胺(分析纯)(北京芳草医药化工研制公司);其它均为分析纯试剂。rn MN81注射液:医院制剂,批号为20000107;规格为l mg/2ml;以10%小牛血清RPMI 1640培养液将该注射液稀释至实验用浓度。1.3 标准曲线的制备精密称取NaNO2 6.9 mg,加水至100.Oml(1mmol/L),分别精密吸取1 mmol/L NaNO2液0.5,1.0,1.5,2.0 ml,加水至10.0ml(50,100,150,200 nmol/L);各液100μl,加Griess试剂(含1%磺胺、0.1%N-1-萘乙二胺盐酸盐、2.5%磷酸)100μl,室温放置10min,在酶标仪(∑960)上490 nmol/L处测定各孔吸收度值;以浓度值(C)为横座标、相应的吸收度值(A)为纵座标绘制标准曲线。结果为:C(nmol/L)=210.2293A+1.0240.r=0.9999。
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