【摘 要】
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目的建立一种 PKH26体外荧光标记人骨髓间质干细胞(MSCs)的方法。方法培养人骨髓间质干细胞,按 PKH26标记程序进行标记后培养,采用激光共聚焦显微镜、流式细胞分析,观察标记
【基金项目】
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国家自然科学基金(30471938);卫生部科学研究基金(WKJ2005-2-024);镇江市检验医学重点实验室项目(SH2006066);江苏大学创新预研基金(04CX07);江苏大学高级人才启动基金(04JDG028)
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目的建立一种 PKH26体外荧光标记人骨髓间质干细胞(MSCs)的方法。方法培养人骨髓间质干细胞,按 PKH26标记程序进行标记后培养,采用激光共聚焦显微镜、流式细胞分析,观察标记后人 MSCs 生长状态、荧光强度变化和传代培养效果。应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)等方法观察标记细胞的生物学功能。结果标记后 MSCs 呈红色荧光,标记率达100%,体外连续传代培养7代后,荧光标记细胞荧光强度逐渐减弱,荧光标记细胞百分比逐渐减低。PKH26标记MSCs 的生长形态、生长活力、nucleostemin、三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因表达及体外诱导分化能力等生物学特性不发生改变。结论 PKH26荧光标记人 MSCs 是一种有效、实用的方法,该方法对MSCs 转归、可塑性及 MSCs 移植治疗研究具有重要的价值。
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