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关键词：磷酸肌酸激酶、假性降低、基质耗尽、生化分析仪
中图分类号：R818.053 文献标识码：A 文章编号：1005-0515（2013）5-021-01
我们在平时用全自动生化分析仪检测磷酸肌酸激酶（CK）时，发现两例CK较高值标本检测出结果却很低，经稀释后重测结果很高。为此我们进行了多次实验分析，得出结果很低原因，现报道如下：
一、材料与方法
1、仪器与试剂
1.1仪器：日立7180全自动生化分析仪
1.2试剂：宁波美康公司CK试剂，批号：20120815，当天CK质控结果在质控范围。
2.病例：两例病人均为胸闷、心悸、呼吸困难来我院就诊。
二、结果
2.1两例患者心肌酶谱结果均值为天门冬氨酸转氨酶（AST）342U/L，磷酸肌酸激酶（CK）8U/L，肌酸激酶同功酶（CK-MB）324U/L，乳酸脱氢酶（LDH）912U/L。两患者心肌酶谱结果均很高，唯有CK值很低与其临床表现和其他检查结果明显不相符，CK结果仪器未出现任何提示。
2.2将患者血清标本直接重复再检测3次CK结果为6-10U/L，平均为8U/L，平均吸光度（A）值0.0042，与初次测定结果基本相同，该标本在检测过程中仪器无任何提示。然而将标本用9g/L NaCL溶液稀释10倍后重新测定3次，平均1120U/L，A值为0.1250，结果乘以稀释倍数10，最后结果为11200U/L。
三、讨论
3.1底物耗尽现象是由于各实验室在线性反应期内进行检测，当所检测的酶浓度特别高时，在延迟反应时间或测量点范围内就已经大量消耗基质，以致线性期内检测不到吸光度的变化而出现低值结果。
3.2本文报道的两例CK初次测定结果很低不准确原因就是因CK测定系统发生了基质耗尽，使得初次检测结果为6U/L。在酶活性检测工作中，检测试剂由试剂公司提供，不同公司提供的试剂其酶活性检测线性范围与试剂质量有直接关系，试剂公司提供的试剂盒所含的底物浓度在一般情况下是足够大的，可以满足绝大多数临床标本的实际检测需要，而本文中两例患者CK酶的活性远远超过试剂盒所提供检测线性范围，也就是零级反应期非常短，不能有效完成速率法检测，以至于检测结果很低。
3.3在动力学方法的实验中，特别是一些酶的测定中应特别注意基质耗尽问题[1]。不同型号生化分析仪的设计不一样，有的为零点与监测第一A值的差额；有的A值上升或下降至指定A值的数值。超过限额说明样本酶活性非常高，底物将要耗尽，或已经耗尽，随后监测A值已不可靠，样本应稀释5-10倍[2]，甚至更多倍。大型生化分析仪可以设置限额参数来监测是否基质耗尽[3]。本报道的两例CK测定的A值显然已大大超过了A值设定的限额范围，所以无法得到真实的数据。
3.4在其它酶的测定中也应引起注意， 如当人体肝脏、心脏等器官发生损伤时，ALT、AST、CK、等酶的释放使血中浓度大幅度升高，但通常这些酶活性不会超过试剂盒所提供的检测线性范围，所以绝大多数检测结果是可靠、准确的。但是，当器官损伤特别严重，样本中酶的活性远远超过试剂盒所提供检测线性范围时，也就是零级反应期非常短，不能有效完成速率法检测，此时的检测结果就是无效的、不准确的，应高度重视，以防漏报错报结果，以免耽误诊断治疗。
参考文献：
[1]顾光煜，王以立，陈维忠，等.临床化学自动分析仪应用指南[M].北京：海洋出版社，1993.82-87，138-140.
[2]周新，涂植光.临床生物化学和生物化学检验[M].第3版.北京：人民出版社，2004.154.
[3]石寅皓.全自动生化分析仪限额参数的设置[J].临床检验杂志，1998，16（2）：95-96.
中图分类号：R818.053 文献标识码：A 文章编号：1005-0515（2013）5-021-01
我们在平时用全自动生化分析仪检测磷酸肌酸激酶（CK）时，发现两例CK较高值标本检测出结果却很低，经稀释后重测结果很高。为此我们进行了多次实验分析，得出结果很低原因，现报道如下：
一、材料与方法
1、仪器与试剂
1.1仪器：日立7180全自动生化分析仪
1.2试剂：宁波美康公司CK试剂，批号：20120815，当天CK质控结果在质控范围。
2.病例：两例病人均为胸闷、心悸、呼吸困难来我院就诊。
二、结果
2.1两例患者心肌酶谱结果均值为天门冬氨酸转氨酶（AST）342U/L，磷酸肌酸激酶（CK）8U/L，肌酸激酶同功酶（CK-MB）324U/L，乳酸脱氢酶（LDH）912U/L。两患者心肌酶谱结果均很高，唯有CK值很低与其临床表现和其他检查结果明显不相符，CK结果仪器未出现任何提示。
2.2将患者血清标本直接重复再检测3次CK结果为6-10U/L，平均为8U/L，平均吸光度（A）值0.0042，与初次测定结果基本相同，该标本在检测过程中仪器无任何提示。然而将标本用9g/L NaCL溶液稀释10倍后重新测定3次，平均1120U/L，A值为0.1250，结果乘以稀释倍数10，最后结果为11200U/L。
三、讨论
3.1底物耗尽现象是由于各实验室在线性反应期内进行检测，当所检测的酶浓度特别高时，在延迟反应时间或测量点范围内就已经大量消耗基质，以致线性期内检测不到吸光度的变化而出现低值结果。
3.2本文报道的两例CK初次测定结果很低不准确原因就是因CK测定系统发生了基质耗尽，使得初次检测结果为6U/L。在酶活性检测工作中，检测试剂由试剂公司提供，不同公司提供的试剂其酶活性检测线性范围与试剂质量有直接关系，试剂公司提供的试剂盒所含的底物浓度在一般情况下是足够大的，可以满足绝大多数临床标本的实际检测需要，而本文中两例患者CK酶的活性远远超过试剂盒所提供检测线性范围，也就是零级反应期非常短，不能有效完成速率法检测，以至于检测结果很低。
3.3在动力学方法的实验中，特别是一些酶的测定中应特别注意基质耗尽问题[1]。不同型号生化分析仪的设计不一样，有的为零点与监测第一A值的差额；有的A值上升或下降至指定A值的数值。超过限额说明样本酶活性非常高，底物将要耗尽，或已经耗尽，随后监测A值已不可靠，样本应稀释5-10倍[2]，甚至更多倍。大型生化分析仪可以设置限额参数来监测是否基质耗尽[3]。本报道的两例CK测定的A值显然已大大超过了A值设定的限额范围，所以无法得到真实的数据。
3.4在其它酶的测定中也应引起注意， 如当人体肝脏、心脏等器官发生损伤时，ALT、AST、CK、等酶的释放使血中浓度大幅度升高，但通常这些酶活性不会超过试剂盒所提供的检测线性范围，所以绝大多数检测结果是可靠、准确的。但是，当器官损伤特别严重，样本中酶的活性远远超过试剂盒所提供检测线性范围时，也就是零级反应期非常短，不能有效完成速率法检测，此时的检测结果就是无效的、不准确的，应高度重视，以防漏报错报结果，以免耽误诊断治疗。
参考文献：
[1]顾光煜，王以立，陈维忠，等.临床化学自动分析仪应用指南[M].北京：海洋出版社，1993.82-87，138-140.
[2]周新，涂植光.临床生物化学和生物化学检验[M].第3版.北京：人民出版社，2004.154.
[3]石寅皓.全自动生化分析仪限额参数的设置[J].临床检验杂志，1998，16（2）：95-96.