【摘 要】
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目的 探讨在小鼠模型中H5N1型流感病毒神经氨酸酶（neuraminidase,NA）的免疫原性，并进行攻毒试验评价其免疫保护作用。方法 制备H5N1型流感病毒裂解疫苗原液，磁珠法纯化获取NA蛋白。将BALB/c小鼠分为2μg NA、10μg NA、50μg NA、2μg NA+MF59、10μg NA+MF59、50μg NA+MF59和MF59组，共7组，每组10只，肌内注射免疫。初次免疫2周
【基金项目】
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国家“重大新药创制”科技重大专项资助项目（2016ZX09106003-008）；
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目的 探讨在小鼠模型中H5N1型流感病毒神经氨酸酶（neuraminidase,NA）的免疫原性，并进行攻毒试验评价其免疫保护作用。方法 制备H5N1型流感病毒裂解疫苗原液，磁珠法纯化获取NA蛋白。将BALB/c小鼠分为2μg NA、10μg NA、50μg NA、2μg NA+MF59、10μg NA+MF59、50μg NA+MF59和MF59组，共7组，每组10只，肌内注射免疫。初次免疫2周后，相同程序/剂量进行加强免疫，第4周采血分离血清，ELISA法测定效价；第5周进行攻毒试验，监测攻毒后2周内小鼠体重和体温变化，同时观察临床症状。结果 磁珠法纯化的H5N1 NA纯度达90%，浓度为201.23μg/mL。2次免疫后，各剂量组血清效价呈剂量依赖性，加MF59佐剂组血清抗体效价均高于未加MF59佐剂组，其中50μg NA+MF59组效价最高（平均效价为121 600）。攻毒试验发现，50μg NA+MF59能够保护100%（8只）的小鼠免受H5N1攻击，攻毒后50μg NA+MF59组临床评分低于MF59组，但两组小鼠体温变化差异无统计学意义（P> 0.05）。结论 免疫H5N1 NA能够诱导BLAB/c小鼠产生NA特异性抗体，使用MF59佐剂能够显著提高抗体效价，保护小鼠免受半数致死剂量的H5N1攻击，并能明显减轻临床症状。
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