【摘 要】
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目的 探讨在小鼠模型中H5N1型流感病毒神经氨酸酶(neuraminidase,NA)的免疫原性,并进行攻毒试验评价其免疫保护作用。方法 制备H5N1型流感病毒裂解疫苗原液,磁珠法纯化获取NA蛋白。将BALB/c小鼠分为2μg NA、10μg NA、50μg NA、2μg NA+MF59、10μg NA+MF59、50μg NA+MF59和MF59组,共7组,每组10只,肌内注射免疫。初次免疫2周
【基金项目】
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国家“重大新药创制”科技重大专项资助项目(2016ZX09106003-008);
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目的 探讨在小鼠模型中H5N1型流感病毒神经氨酸酶(neuraminidase,NA)的免疫原性,并进行攻毒试验评价其免疫保护作用。方法 制备H5N1型流感病毒裂解疫苗原液,磁珠法纯化获取NA蛋白。将BALB/c小鼠分为2μg NA、10μg NA、50μg NA、2μg NA+MF59、10μg NA+MF59、50μg NA+MF59和MF59组,共7组,每组10只,肌内注射免疫。初次免疫2周后,相同程序/剂量进行加强免疫,第4周采血分离血清,ELISA法测定效价;第5周进行攻毒试验,监测攻毒后2周内小鼠体重和体温变化,同时观察临床症状。结果 磁珠法纯化的H5N1 NA纯度达90%,浓度为201.23μg/mL。2次免疫后,各剂量组血清效价呈剂量依赖性,加MF59佐剂组血清抗体效价均高于未加MF59佐剂组,其中50μg NA+MF59组效价最高(平均效价为121 600)。攻毒试验发现,50μg NA+MF59能够保护100%(8只)的小鼠免受H5N1攻击,攻毒后50μg NA+MF59组临床评分低于MF59组,但两组小鼠体温变化差异无统计学意义(P> 0.05)。结论 免疫H5N1 NA能够诱导BLAB/c小鼠产生NA特异性抗体,使用MF59佐剂能够显著提高抗体效价,保护小鼠免受半数致死剂量的H5N1攻击,并能明显减轻临床症状。
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