论文部分内容阅读
目的
探讨牛乳铁蛋白(bLF)在体外对大鼠空肠上皮细胞株(IEC-6)细胞增殖和对脂多糖(LPS)诱导的细胞炎性反应的影响及机制。
方法体外培养IEC-6细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度bLF时IEC-6细胞的活性,5-溴脱氧尿苷(Brdu)标记检测bLF对细胞增殖能力的影响,荧光定量PCR及酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA水平,Western blot检测bLF对LPS诱导的炎症信号通路中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)及核因子-κB(NF-κB)水平。
结果bLF在体外可促进IEC-6细胞活性和增生能力,并呈浓度依赖效应(F=3.825、5.861,均P<0.05),当处理质量浓度为100 mg/L时,IEC-6细胞活性和增殖能力逐渐增强(q=5.240、3.765,均P<0.05)。应用100 mg/L质量浓度的bLF预处理IEC-6细胞可明显降低IL-1β、IL-6及TNF-α 的mRNA表达水平(q=14.28、10.12、16.45,均P<0.001),并降低IL-6和TNF-α蛋白的表达(q=15.06、6.74,均P<0.001)。与单独LPS组相比,应用100 mg/L质量浓度的bLF预处理IEC-6细胞可使MAPK/NF-κB通路的激活水平下降(q=12.96、18.54,均P<0.001)。
结论bLF在体外可促进大鼠IEC-6细胞活性及增殖能力,并通过抑制MAPK/NF-κB信号通路起到抑制LPS诱导的炎性反应的作用。