F344大鼠树突状细胞的分离与培养

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目的研究F344大鼠树突状细胞(DC)的分离与培养方法.方法取大鼠四肢骨骨髓细胞悬液,经梯度离心法得到DC,加入白细胞介素(IL)-4、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF),全RPMI 1640培养,经倒置显微镜、电镜及流式细胞仪鉴定细胞纯度及成熟度.结果细胞培养的第8天,经倒置显微镜、电镜观察DC出现典型形态;流式细胞仪检测第4天OX62阳性率为8.92%、主要组织相容性复合物(MHC)-Ⅱ为20.90%、CD86为16.98%;第8天OX62阳性率为58.07%、MHC-Ⅱ为60.49%、CD86为62.94%;第15天OX62阳性率为84.68%、MHC-Ⅱ为88.03%、CD86为62.80%.结论用该方法得到的DC纯度可达80%以上,为进一步研究其在肿瘤研究中的应用打下基础.
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