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目的
研究低频超声联合微泡在促进脂质体介导的人前列腺癌细胞野生型P53基因转染中的作用。
方法选用频率为21 kHz,功率为46 mW/cm2的低频超声,占空比2∶8(开2 s,停8 s),辐照人前列腺癌PC-3细胞5 min。PC-3细胞制成细胞悬液,调整细胞浓度为1×105个/ml,细胞分为8组:对照组、单独微泡组、单独超声组、超声联合微泡组、单独脂质体组、脂质体联合微泡组、脂质体联合超声组、脂质体联合超声及微泡组。每微泡组加入常规配置的声诺维200 μl,每组均加入野生型P53质粒,质粒与脂质体比为1∶2。辐照后继续培养24 h,荧光定量及western-blot检测基因转染效率,CCK-8检测细胞OD值,计算细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡。
结果转染后脂质体联合超声及微泡组较单独脂质体组及对照组能够明显提高人野生型P53基因及蛋白的表达,差异均有统计学意义(P<0.001)。转染后脂质体联合超声及微泡组较单独脂质体组及对照组明显提高人前列腺癌PC-3细胞凋亡率,差异均有统计学意义(P<0.001),并且转染后脂质体联合超声、微泡组较单独脂质体组及对照组细胞存活明显受抑制,差异均有统计学意义(P<0.001)。
结论低频低能量超声联合微泡能够促进脂质体介导的人野生型P53基因的转染。