缺氧诱导离体培养乳鼠心肌细胞的凋亡

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目的:建立一种新的SD乳鼠心肌细胞的缺氧模型,探讨心肌细胞缺氧损伤和心肌细胞凋亡的分子变化及其时序分布特点.方法:SD乳鼠的培养心肌细胞随机分为5组:对照组、缺氧12 h组(I12)、缺氧24 h组(I24)、缺氧48 h组(I48)和缺氧72 h组(I72).应用原位缺口末端标记法(TUNEL)和透射电镜手段检测心肌细胞凋亡的改变.结果:在本实验的心肌细胞缺氧模型中,TUNEL法检测发现,对照组各时间点培养的心肌细胞未见或偶见TUNEL阳性细胞;心肌细胞缺氧12h即有少量的TUNEL阳性细胞,随着缺氧、缺血时间的延长,TUNEL阳性凋亡细胞数目和密度逐渐增高,当培养心肌细胞在本实验模型中缺氧72h可见大量的TUNEL阳性凋亡细胞.透射电镜检查发现,正常对照组、缺氧12h组心肌细胞结构基本正常.凋亡的心肌细胞在本实验模型中缺氧24h即出现,但不典型,缺氧48 h心肌细胞出现了典型的早期凋亡特征,并以缺氧72 h最多见.结论:本实验乳鼠心肌细胞缺氧模型可导致心肌细胞凋亡,凋亡程度和心肌细胞缺氧时间有关,并可导致和在体心肌缺血相似的心肌损伤.细胞凋亡在心肌缺氧心肌细胞死亡中起重要作用.
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