【摘 要】
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目的 探究淫羊藿苷（icarrin, Ica）对D-半乳糖（D-gal）诱导的衰老骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs）成骨的影响及机制。方法 通过全骨髓贴壁法提取BMSCs,采用流式细胞术及成骨、成脂诱导分化鉴定细胞。通过CCK8法检测D-gal及Ica处理BMSCs的最适浓度，用D-gal诱导BMSCs衰老，药物干预48 h; 6
【基金项目】
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上海市卫生健康委员会科研课题计划（202040151）； 上海市普陀区中心医院、上海中医药大学附属普陀医院临床匠才计划（2022-RCJC-08）；
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目的 探究淫羊藿苷（icarrin, Ica）对D-半乳糖（D-gal）诱导的衰老骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs）成骨的影响及机制。方法 通过全骨髓贴壁法提取BMSCs,采用流式细胞术及成骨、成脂诱导分化鉴定细胞。通过CCK8法检测D-gal及Ica处理BMSCs的最适浓度，用D-gal诱导BMSCs衰老，药物干预48 h; 6SA-β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老情况；碱性磷酸酶试剂检上清液ALP水平；RT-PCR和Western Blot分别检测BMSCs中衰老相关P16、P53、P21及成骨相关Foxo3a、β-catenin的蛋白表达。结果 BMSCs表面标志物CD44和CD90表达大于95%;CD34、CD45表达小于5%,且能被定向诱导分化出钙结节及脂滴，鉴定细胞为BMSCs。CCK8检测出30 mg/mL为D-gal的最适浓度，10-8、10-10 mol/L为Ica最适浓度。Ica能减少衰老BMSCs中P16、P53、P21 mRNA的表达；降低Foxo3a mRNA和蛋白表达，增加β-catenin mRNA和蛋白的表达，差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论 D-gal能够诱导构建出衰老BMSCs模型；Ica增加了衰老BMSCs上清液中的ALP含量、降低了衰老BMSCs中P53的表达水平，可能通过调节成骨相关信号通路Foxo3a/β-catenin表达，起到对衰老BMSCs成骨分化能力的改善作用。
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