携带人金属蛋白酶组织抑制剂1重组腺病毒的构建及在人脐静脉内皮细胞中的表达

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目的构建携带人金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMPl)的重组腺病毒AdV—hTIMPl,感染体外培养的人脐静脉内皮细胞CRL-1730,观察其mRNA表达情况。方法应用AdEasy复制缺陷型腺病毒载体系统在大肠埃希菌BJ5183中通过同源重组构建Ad—hTIMPl和对照Ad—Track。阳离子脂质体法将重组腺病毒转染到人胚胎肾细胞(HEK293T)中进行包装和扩增。纯化后PCR鉴定hTIMPl目的基因,OD260法测定滴度,透射电镜观察腺病毒形态。将人脐静脉内皮细胞CRL-1730分为3组,空白对照组、Tra
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