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目的
研究甲状腺细针穿刺标本行BRAF基因检测过程中常见的问题，探讨需要重复实验样本的条件，并提出一套更为完善的检测及判读过程。
方法收集中日友好医院2012年2月至2018年7月期间送检的8 644例甲状腺细针穿刺标本，使用即时定量PCR法检测BRAF基因突变。对实验结果模棱两可或与临床或细胞学诊断不符的237例样品进行重复实验。
结果最终BRAF基因突变阳性率22.0%（1 897/8 625），DNA质控不合格样品19例。样品的平均内质控荧光Ct值为16.061，阳性标本的平均荧光值为19.147。237例重复实验中，第一次DNA质控不合格重复后仍然不合格者占51.4%（19/37），合格者占48.6%(18/37),其中阳性1例，阴性17例。阴性标本重复40例，结果均未发生改变。第一次实验阳性，BRAF基因与内质控基因荧光Ct值差值在8~12之间的样品，重复后40.4%（40/99）的标本转变为阴性；差值在12以上的标本，重复后69.8%（37/53）的样品转变为阴性。BRAF突变的灵敏度与特异性分别为83.97%与96.94%。
结论推荐将BRAF荧光Ct值与内质控荧光Ct值的差值作为判读实验结果是否可靠的一个指标，一般差值大于8的样品应当进行重复实验。