【摘 要】
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目的通过在人卵巢癌SKOV3细胞中转染微小RNA-125b(miR-125b)真核表达质粒,探讨miR-125b过表达对SKOV3细胞失巢凋亡的作用及可能机制。方法针对miR-125b基因序列设计并合成两
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目的通过在人卵巢癌SKOV3细胞中转染微小RNA-125b(miR-125b)真核表达质粒,探讨miR-125b过表达对SKOV3细胞失巢凋亡的作用及可能机制。方法针对miR-125b基因序列设计并合成两条寡聚DNA片段,并克隆入pSilencer 2.1-U6-neo质粒中,脂质体法将重组质粒转染人卵巢癌SKOV3细胞。定量PCR方法检测miR-125b,以及BDNF和TrkB基因mRNA表达;Western blot检测BDNF和TrkB蛋白表达;体外侵袭模型检测细胞侵袭能力;失巢凋亡模型及流式细胞术检测细胞失巢凋亡。结果成功构建miR-125b真核表达载体并转染人卵巢癌SKOV3细胞,SKOV3细胞miR-125b表达增加;同时BDNF和TrkB基因mRNA和蛋白表达均降低;穿透Matrigel膜的细胞数减少;细胞失巢凋亡增加。结论 miR-125b基因过表达能够诱导人卵巢癌SKOV3细胞失巢凋亡和抑制细胞侵袭能力,抑制BDNF/TrkB途径可能是其作用机制。
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