【摘 要】
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目的 探讨三氧化二砷(Arsenic trioxide,As2O3)与酪氨酸激酶抑制剂甲磺酸伊马替尼(实验药物代号STI571)以及细胞周期调节剂咖啡因联合诱导K562细胞凋亡的作用及机制,为寻找克服K562细胞对As2O3抵抗的有效手段提供实验依据.方法以As2O3与STI571、咖啡因联合作用于K562细胞,采用MTY方法检测细胞增生活性,PI染色流式细胞仪检测细胞周期,PI和AnnexinV
【机 构】
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目的 探讨三氧化二砷(Arsenic trioxide,As2O3)与酪氨酸激酶抑制剂甲磺酸伊马替尼(实验药物代号STI571)以及细胞周期调节剂咖啡因联合诱导K562细胞凋亡的作用及机制,为寻找克服K562细胞对As2O3抵抗的有效手段提供实验依据.方法以As2O3与STI571、咖啡因联合作用于K562细胞,采用MTY方法检测细胞增生活性,PI染色流式细胞仪检测细胞周期,PI和AnnexinV双染色流式检测细胞凋亡,Western blot法检测细胞周期相关调节蛋白的表达.结果5.0 μmol/L浓度的咖啡因对K562细胞增生无抑制作用,亦不能增强As2O3的抑制作用,单独以STI5711.0 μmol/L处理,即可有效抑制K562细胞的生长,与As2O3联用能明显增加其抑制增生的效应;咖啡因与As2O3联合作用,不增加As2O3诱导的K562细胞凋亡率[(14.7±3.6)%vs(15.3±3.3)%,P＞0.05];STI571具有轻度诱导K562细胞凋亡的作用[(18.3±4.5)%],与As2O3合用可显著增加诱导凋亡率[(14.7±3.6)%vs(42.8±4.2)%,P＜0.01],并明显降低As2O3诱导的G2/M期细胞比例.与单用As2O3比较,As2O3+STI571明显抑制cdc2、cdc2-p及survivin蛋白表达,而As2O3与咖啡因合用不能诱导survivin蛋白表达下调,对cdc2、cdc2-p蛋白的表达无明显影响.结论周期调节药物咖啡因对As2O3诱导K562细胞凋亡无增敏作用;酪氨酸激酶抑制剂STI571能协同As2O3诱导K562细胞凋亡,下调抗凋亡蛋白survivin的表达可能是其机制之一,值得深入研究其临床应用效果。
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