人端粒酶催化亚单位(hTERT)特异性核酶对乳腺癌细胞MCF-7活性的作用及影响

来源 :北华大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:kzyzf
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目的 探讨端粒酶特异性核酶对乳腺癌细胞MCF-7端粒酶活性、增殖和凋亡的影响.方法 设计合成RZ基因,构建人端粒酶锤头状核酶真核表达质粒pcDNA3.1(+).hTERT—RZ,测序鉴定.提取MCF-7细胞总RNA,RT-PCR扩增靶基因的cDNA片段,插入载体pMD18-T并测序鉴定.将核酶重组体及hTERT载体体外转录,琼脂糖凝胶电泳检测RZ的切割活性.核酶载体转染乳腺癌细胞MCF-7,RT—PCR法检测核酶重组子转染效率及核酶转染细胞中hTERTmRNA的表达量,TRAP法测定细胞端粒酶活性,MTT
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