利用重组反转录病毒表达马立克氏病病毒Meq基因

来源 :中国兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dasaqa
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
为研究马立克氏病病毒(MDV)Meq蛋白的生物学功能,应用磷酸钙与MDVMeq基因重组的反转录病毒转染载体质粒RCAS-Meq的DNA,转染于鸡胚成纤维细胞系DF1。经间接免疫荧光技术研究表明,转染后第3天即开始有少量DF1细胞在细胞核表达Meq蛋白,以后阳性细胞增多,到转染后第7天阳性细胞最多,之后荧光即衰减;通过酶联免疫吸附试验检测,发现细胞培养上清中游离病毒在转染后第5天即可检出,直至第7天仍维持最高水平,第9天开始下降。用细胞培养上清感染DF1细胞单层,于感染后第2天即可检出Meq蛋白阳性细胞,之后阳性细胞逐渐增多,到第4~5天达高峰,之后逐渐衰减;培养上清中的游离病毒在感染后第4天即可被检出,第5~7天达最高值。研究结果表明:(1)磷酸钙法能很好地将重组质粒RCAS-MeqDNA转染到DF1细胞中,而对细胞的损伤很小;(2)转染后细胞释放出的重组病毒能感染DF1细胞并稳定地表达Meq蛋白。表明Meq基因在构建的重组病毒基因组中的存在及其转录表达都是稳定的。这为在体内和体外研究MDVMeq基因的生物学功能提供了一种非常有效的方法和途径;(3)Meq蛋白仅分布于细胞核(包括核质和核仁)。这一结果证实了?
其他文献
1 临床症状最初主要是怀孕2个月以上的母猪,多数在临产前10 d左右发病,厌食,喝水少,眼圈发红.粪干呈球状,体温升高,嗜睡,气喘.早产后出现死胎,弱胎.商品肉猪则是减食,嗜睡,粪
电控技术对于当代汽车的发动机而言是一种十分重要的技术,同时也是汽车制造专业的学生所必须要掌握的一项知识和技能。对于汽车发动机的系统构成和故障排除以及维护和维修都
【目的】探讨加味桃核承气汤及其拆方对糖尿病损伤人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养液中组织型纤维蛋白溶酶原活化物(tPA)和纤维蛋白溶酶原活化物抑制剂-1(PAI-1)含量的影响。【
笔者从医30余年,在临床中时常见到一些疑似猪瘟病例,经多种药物治疗,未见其效.本人探索用加倍量猪瘟活疫苗并结合蟾酥浆汁卡耳,治疗温和型猪瘟几十例,都获得一定疗效,现简介
对我国最为流行的血清4、5、12、13和14型副猪嗜血杆菌进行了豚鼠和仔猪毒力试验的比较研究。豚鼠毒力试验结果表明,对豚鼠毒力最强的是12和14型菌株,其LD50均低于3.5×108 C
我的原工作单位是河北省沽源县兽医院,高级兽医师,现已退休。上世纪60年代,我从河北中兽医学校毕业后,就到公社兽医站做门诊治疗工作。工作中遇到许多新问题,是《中兽医学杂志》帮
腹水,也称为腹腔积水,中兽医古籍叫"宿水停脐",多为慢性继发性疾病,犬较其它动物多发,最常见于老龄犬和幼犬.
鸡新城疫俗称鸡瘟,是由新城疫病毒引起的一种急性、高度接触性传染病.该病的特点是体温升高,呼吸困难,严重腹泻,神经紊乱及黏膜、浆膜出血等败血症变化.本病分布广,传播快,病
在建筑工程中,为了保证管理工作能够安全有序的进行,不但需要有建筑施工技术的良好支撑,还需要做好项目管理工作。如今仍然有一些问题存在于项目管理的过程中,相关的管理团队
【目的】了解妊娠期子宫畸形的诊治情况及主要并发症。【方法】回顾性分析我院 1980~ 2 0 0 0年我院收治的妊娠期合并子宫畸形的类型、分娩方式、诊断情况及主要并发症。【结