【摘 要】
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目的研究颗粒蛋白前体(progranulin,PGRN)对滋养层细胞侵袭、凋亡的影响,并探讨其在子痫前期发病机制中的作用。方法取子痫前期患者胎盘组织,测定其中PGRN mRNA和蛋白表达。
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目的研究颗粒蛋白前体(progranulin,PGRN)对滋养层细胞侵袭、凋亡的影响,并探讨其在子痫前期发病机制中的作用。方法取子痫前期患者胎盘组织,测定其中PGRN mRNA和蛋白表达。选择子痫前期的3种滋养层细胞系JEG-3、BeWo、JAR以及人原代培养的滋养层细胞,通过定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction,q PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)实验确定PGRN在其中的表达情况。利用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)干扰和过表达该细胞系中的PGRN,用qPCR、Western blot实验确定干扰或过表达有效后,分别通过Transwell侵袭实验和流式细胞术测定PGRN差异表达对滋养层细胞侵袭和凋亡的影响,同时在分子水平测定侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2、-9和凋亡蛋白Caspase-3的表达及活性。结果子痫前期患者胎盘组织中PGRN在mRNA和蛋白水平的表达都显著高于正常组(P <0. 05)。JEG-3、BeWo、JAR细胞系中的PGRN蛋白水平显著高于原代滋养层细胞(P <0. 05)。在BeWo滋养层细胞中,干扰PGRN表达后,其侵袭能力减弱(P <0. 05),凋亡增加(P <0. 01)。分子水平上,MMP-2、MMP-9活性减弱(P <0. 05),Caspase-3裂解量增加(P <0. 01)。而过表达PGRN后,BeWo细胞侵袭能力(P <0. 05)和抗凋亡能力(P <0. 01)增加。结论 PGRN能够促进滋养层细胞侵袭和抑制细胞凋亡,通过上调PGRN可能减少子痫前期的发生和发展。
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