smad4 shRNA真核表达质粒的构建及鉴定

来源 :肿瘤防治研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户：skychi

【摘要】

：

目的针对smad4基因的不同部位,构建不同smad4shRNA表达质粒载体,在转录后水平抑制smad4的表达,对其克隆进行鉴定并挑选出抑制效率最高的克隆。方法用DNA重组技术将针对人smad

【作者】

：

吴鹏田媛桂伶俐陈刚卢运萍周剑锋马丁

【机构】

：

华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科,华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉科,华中科技大学同济医学院附属同济医院血液内科

【出处】

：

肿瘤防治研究

【发表日期】

：

2007年8期

【关键词】

：

宫颈癌 SHRNA SMAD4 Cervical cancer shRNA smad4

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目的针对smad4基因的不同部位,构建不同smad4shRNA表达质粒载体,在转录后水平抑制smad4的表达,对其克隆进行鉴定并挑选出抑制效率最高的克隆。方法用DNA重组技术将针对人smad4基因不同部位所设计的3对shRNA序列克隆到真核表达质粒pGenesil-1中,构建smad4shRNA表达载体pGenesil-smad4-shRNA1、2、3。脂质体介导转染人宫颈癌细胞株HeLa,经G418筛选抑制smad4表达的稳定细胞克隆。结果3个smad4shRNA表达载体pGenesil-smad4-s

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