产气荚膜梭菌ε毒素突变体的表达及免疫保护力评价

来源 :中国兽药杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pudding_dophin
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为获得产气荚膜梭菌ε毒素(ETX)的重组突变体,并评价其毒力及免疫原性。对已知的D型产气荚膜梭菌ETX编码基因进行优化设计,并将第106位组氨酸突变为脯氨酸,经人工合成获得基因片段GETX H106P 。将GETX H106P 克隆至原核表达载体pET30a(+),转染BL21(DE3)菌中进行表达与纯化,从而获得重组蛋白rETX H106P 。利用Western blot方法检测rETX H106P 与D型产气荚膜梭菌抗血清的反应性,并检测其对犬肾细胞系(MDCK细胞)以及小鼠的毒力。随后,将rETX
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