断藤益母汤调控TGF-β通路减少类风湿关节炎软骨细胞基质降解的研究

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目的 研究断藤益母汤(Duanteng Yimu Decoction,DTYMD)对类风湿关节炎软骨细胞中基质降解的影响及其作用机制.方法 收集类风湿关节炎患者的膝关节软骨组织及滑膜组织并进行体外细胞培养;使用CCK8法检测断藤益母汤对RA FLSs及软骨细胞活力的影响;使用Transwell小室建立RA FLSs与软骨细胞的共培养系统;使用实时荧光定量PCR检测共培养后的软骨细胞中MMP1、MMP-3、MMP-9、MMP-13、ADAMTS-4、ADAMTS-5 mRNA的表达,免疫印迹法检测共培养后的软骨细胞中MMP-9、MMP-13、ADAMTS-5、TGF-β1、TGF-β R2、Smad4蛋白的表达和Smad2/3蛋白的磷酸化水平.结果 断藤益母汤在100,200,400μg/ml的浓度对类风湿关节炎软骨细胞及FLS的活力没有明显的影响;断藤益母汤降低了软骨细胞MMP1、MMP-3、MMP-9、MMP-13、ADAMTS-4、ADAMTS-5 mRNA的表达(P <0.05或P<0.01).免疫印迹分析结果显示断藤益母汤降低了软骨细胞MMP-9、MMP-13、ADAMTS-5的蛋白表达,并且抑制了TGF-β1、TGF-β R2、Smad4的蛋白表达(P<0.05或P<0.01),也减少了Smad2/3蛋白的磷酸化(P<0.05或P<0.01).结论 断藤益母汤调控TGF-β通路减少软骨细胞中的基质降解.
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