【摘 要】
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目的构建携载人基质金属蛋白酶组织抑制剂-2(hTIMP-2)基因的重组腺病毒载体,为基因治疗提供实验基础.方法利用基因重组技术将腺病毒骨架质粒pAdEasy-1以及线性化的重组穿梭质
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目的构建携载人基质金属蛋白酶组织抑制剂-2(hTIMP-2)基因的重组腺病毒载体,为基因治疗提供实验基础.方法利用基因重组技术将腺病毒骨架质粒pAdEasy-1以及线性化的重组穿梭质粒pTrack-CMV-hTIMP-2共转化BJ5183受体菌并在其中发生同源重组,利用重组前后抗性的改变筛选出重组子,重组腺病毒质粒AdhTIMP-2经过293细胞的包装,扩增和纯化后,测定病毒滴度.一步法提取细胞总RNA,RT-PCR检测hTIMP-2的mRNA.收集细胞上清,进行Western杂交检测TIMP-2蛋白.
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