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研究背景 结肠癌是人体常见的恶性肿瘤，致死率高、发病率呈增加趋势，对人类健康危害极大。癌细胞的恶性侵袭和淋巴转移是癌症致死的主要原因。研究表明在癌症发生、淋巴转移过程中，常伴有细胞因子的异常表达和抑癌基因的遗传不稳定性突变。 细胞间粘附分子1(Intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)是一种重要的细胞表面跨膜糖蛋白，广泛存在于多种正常细胞表面。正常情况下，在淋巴管内皮细胞不表达，但在血管内皮细胞呈阳性表达。与存在于淋巴细胞表面的特异性配体-淋巴细胞功能相关抗原1(Lymphocyte Function Associated Antigen-1，LFA-1)结合时，ICAM-1促进淋巴细胞与血管内皮细胞的粘附，导致淋巴细胞游出血管，进而向抗原处聚集，参与免疫反应。Vasse研究发现，癌细胞高度表达ICAM-1的配体LFA-1。然而，国内外对结肠癌淋巴管内皮细胞ICAM-1表达的研究罕见，如能证实ICAM-1/LFA-1在参与淋巴细胞与血管内皮细胞粘附，并促进癌细胞与淋巴管内皮细胞的粘附和淋巴转移的发生，对于临床抗肿瘤转移治疗有重要意义。 树突状细胞(Dendritic Cells，DCs)是机体重要的抗原呈递细胞，可将肿瘤性抗原加工、呈递给自然杀伤细胞和细胞毒T细胞，对肿瘤起杀伤作用。研究表明，DCs始终处于机体抗肿瘤免疫调控的中心，局部DCs数量的改变，反映出随着肿瘤的进展，机体抗肿瘤免疫能力的变化。增加肿瘤局部DCs的数量可明 浙江大学硕土学位论文2003显改善患者的预后，致敏性DCS回输已成为近年肿瘤治疗研究的热点。研究结肠癌发生、“淋巴转移时，结肠癌局部DCs的数量和分布，对于评价机体抗肿瘤免疫能力，预测患者预后并采取有效的抗肿瘤免疫疗法，都有十分重要的价值。 ＂m23HI基因定位于17号染色体长臂门 L是一种重要的抑癌基因。Steeg等在对鼠黑色素瘤的研究中发现，＂m23HI基因的特异性表达产物＂m23HI蛋白／核昔二磷酸激酶（NDPK）能有效抑制肿瘤转移，逐将＂m23HI冠以“肿瘤转移抑制基因”，并对其抗肿瘤转移机理进行了大量研究。但多集中于＂m23HI蛋白／核昔二磷酸激酶（NDPK）表达的免疫组织化学研究，有关肿瘤转移时，flm23HI基因的遗传学研究，鲜见报道。研究目的（1）研究结肠癌淋巴转移时，ICAM－l在淋巴管内皮细胞中的表达和DCS数量及分布特征。（2）研究中国人散发性结肠癌患者17号染色体DI 75396位点，MS、LOH与临床病理的关系，以及对 ＂m23Hl蛋白表达的影响。（3）阐明粘附分子的异常表达，以及＂m23Hl基因遗传不稳定性突变与结肠癌进展的关系，为临床治疗提供实验依据。研究方法（l）石蜡包埋组织抽提mA。（2）PCR－单链构象多态性（SSCP），常规银染显示条带。（）Envision免疫组织化学检测，（4）Leica－Qwin计算机图像分析技术。（5）SPSS软件统计分析。研究结果（l）正常结肠组织淋巴管内皮细胞 ICAM－l表达阴性，癌组织淋巴管内皮细胞rMM－l表达呈阳性。（2）随着癌组织浸润深度的增加，ICAM－l阳性淋巴管数目逐渐增多（P＜0．of）。当肠周淋巳结有癌转移时，ICAM－l 阳性淋巴管明显多于无癌转移组（p＜0．01）；（3）与ICAM－1的表达相反，树突状细胞（DCS）局部浸润强度与癌组织浸润深度呈负相关什＝｛．62，PCO．01人 肠周淋巴结无癌转移组mS数目多于有淋巴结转移组①．0入N）30例结肠癌D175396位点贴、LOH检出率和nm23巳蛋白阳性率分别为26．67％、20．00％和53．33％。（5）在肿瘤 TNM分期中，I门期的 MSI检出率和 ＂m23H；蛋白阳性率分别为 43。75％和81．25＊，高于Ill＋IV期的 7．14g（MSI，P＜0．05）和 21．43＊（＂m23Hl，P＜0．01）。而l。011检出率在Ill＋IV期 35．71＊高于 1＋11期 6．2590（P＜0．05）。（6）随着结肠癌病理 Duke’s分期的升高，LOll检出率呈现增加趋势。（7）＂m23H；蛋白阳性率在管状腺癌组为60．00＊，明显高于粘液腺癌组的20．00＊（P＜0．of）。随着管状腺癌分 二 浙江大学硕士学位论文2003．化程度的升高，其阳性率呈增高趋势。（8）＂m23H；蛋白阳性率在MSI阳性组为759，也高于贴I阴性组的 45．45＊（P＜0．05）。（9）计算机图像定量分析显示，＂m23H；蛋白在各临床病理参数影响下的表达强度没有差异。研究结论（l）研究 ICAM－l在淋巴管表达和 DCS的分布数量，有助于判断结肠癌侵袭、转移能力和机体抗肿瘤免疫功能，对于预测结肠癌淋巴转移有重要的临床意义。 （2）MSI和 LOH通过相互独立的途径调控散发性结肠癌的进展。LOll多发生于散发性结肠癌的晚期阶段并赋予散发性结肠癌细胞高侵袭、低预后的表型。相反，MSI是散发性结肠癌的早期分子标志，提高结肠癌局部＂m23H；蛋白表达量可有效抑制结肠癌转?