【摘 要】
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从前列腺癌细胞系LNCaP中提取总RNA,经RT-PCR扩增前列腺特异性膜抗原(PSM)靶序列,将其定向插入带T7RNA聚合酶启动子的pSPORT1质粒,转入大肠杆菌DH5 a,经蓝白斑筛选获得重组质
【机 构】
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南开大学分子生物学研究所生物活性材料教育部重点实验室,中国生物工程开发中心,天津医科大学总医院泌尿外科
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从前列腺癌细胞系LNCaP中提取总RNA,经RT-PCR扩增前列腺特异性膜抗原(PSM)靶序列,将其定向插入带T7RNA聚合酶启动子的pSPORT1质粒,转入大肠杆菌DH5 a,经蓝白斑筛选获得重组质粒.以此重组质粒线性化DNA为模板,以地高辛标记的rUTP及其他三种rNTP为底物,经T7RNA聚合酶体外转录,成功地制备了地高辛标记的PSM特异性RNA探针,为研究以PSM为分子生物学指标的前列腺癌分期诊断奠定了基础.
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