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目的
构建表达IL-2的重组非复制型痘苗病毒株并体外检测其生物活性。
方法以非复制型痘苗病毒天坛株为载体，通过同源重组、蓝白斑纯化筛选表达IL-2的非复制型重组痘苗病毒rNTV1175IL2H6LacZ，并通过PCR对其进行IL-2基因插入鉴定，Western Blot鉴定IL-2的表达，同时对其进行体外生物活性检测。
结果经PCR鉴定，痘苗病毒TK区7.5启动子下正确插入了IL-2基因511bp，Western Blot结果表明其表达IL-2蛋白相对分子质量大小为15000，与标准品IL-2一致。rNTV1175IL2H6LacZ分泌表达在细胞培养液中的IL-2能使IL-2依赖CTLL-2细胞株生长，MTT法测得重组病毒表达在细胞培养液中的IL-2生物活性值为8.79 IU/ml。
结论成功构建了表达具有生物活性IL-2的重组非复制型痘苗病毒株rNTV1175IL2H6LacZ，为其作为病毒载体佐剂应用打下了基础。