论文部分内容阅读
目的 研究组蛋白H4第20位赖氨酸突变对细胞可能存在的影响并探究其分子机制,期望寻找作用于该位点的特异性蛋白,比如H4K20me3去甲基化酶。方法 建立能够表达羧基(C)末端带Flag-HA标签的组蛋白H4及其突变体H4K20M (赖氨酸突变为蛋氨酸),H4K20A (赖氨酸突变为丙氨酸)的HeLa S3细胞系。通过病毒感染法获得能够表达目的蛋白的细胞,碘化丙啶(PI)染色后进行流式细胞(FACS)周期分析。制备单个核小体(mono nucleosome,mono-N),通过免疫共沉淀的方法得到相互作用蛋