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探讨线粒体肌酸激酶1(ubiquitous mitochondrial creatine kinase,CKMT1)在人鼻咽癌细胞株CNE-1对顺铂(cisplatin,DDP)敏感性中的影响。
方法瞬转CNE-1得CKMT1过表达细胞或空载体细胞(EV),MTT法绘制生长曲线、计算DDP IC50,不同浓度DDP处理下平板克隆形成实验,流式细胞术检测细胞周期与凋亡,Western Blot检测凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2/C-PARP及转录因子p-STAT3-Tyr705水平。采用GraphpadPad Prism5软件进行统计学处理。
结果CKMT1和空载体细胞的转染效率均达90%以上;前者的增殖速度高于后者;但前者DDP IC50为2.76 μmol/L,显著低于后者的4.60 μmol/L(t=6.91,P<0.01),且在一定浓度DDP作用下前者的克隆形成率较低;细胞周期在G2/M期阻滞更明显。DDP浓度为2 μmol/L时,CKMT1凋亡率(18.33±0.67)%显著高于EV(11.80±0.70)%(t=6.75,P<0.01);CKMT1的促凋亡蛋白C-PARP和Bax显著高于EV(t=72.63,P<0.01;t=4.22,P<0.05),而凋亡抑制蛋白Bcl-2在CKMT1中的表达显著低于EV(t=49.08,P<0.01);且p-STAT3-Tyr705水平也更低(t=221.60,P<0.01)。
结论DDP作用下,CKMT1可能通过一定的机制抑制STAT3的活化,进而提高CNE-1对DDP的敏感性。