【摘 要】
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[目的]基于p62-核因子红细胞样2相关因子2(Nrf2)通路探讨黄芪甲苷(ASTⅣ)对抗小鼠淋巴细胞白血病耐药株的机制.[方法]复制白血病细胞耐药模型,将细胞分为6组,即空白组(blank)、模型组(model)、黄芪甲苷组(ASTⅣ)、盐酸维拉帕米(VER)、Nrf2通路抑制剂(ML385)组及抑制剂与黄芪甲苷组(ML385+ASTⅣ),药物干预48 h.细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测耐药细胞对顺铂的敏感性,流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)变化,明确ASTⅣ对耐药细胞的影响;流式细胞仪检测细
【机 构】
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天津中医药大学中西医结合学院,天津 301617
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[目的]基于p62-核因子红细胞样2相关因子2(Nrf2)通路探讨黄芪甲苷(ASTⅣ)对抗小鼠淋巴细胞白血病耐药株的机制.[方法]复制白血病细胞耐药模型,将细胞分为6组,即空白组(blank)、模型组(model)、黄芪甲苷组(ASTⅣ)、盐酸维拉帕米(VER)、Nrf2通路抑制剂(ML385)组及抑制剂与黄芪甲苷组(ML385+ASTⅣ),药物干预48 h.细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测耐药细胞对顺铂的敏感性,流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)变化,明确ASTⅣ对耐药细胞的影响;流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率变化,荧光实时定量聚合酶链式反应(Real time PCR)、蛋白免疫印迹(Western Blot)检测p62-Nrf2通路p62、Nrf2、血红素氧化酶-1(HO-1)、B淋巴细胞瘤-2基因(bcl-2)、bcl-2相关蛋白X(bax)及半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)等表达变化明析ASTⅣ对耐药细胞的作用机制.[结果]ASTⅣ通过下调p62-Nrf2通路节点基因p62、HO-1、bcl-2/bax,上调Caspase-3的表达量,降低耐药细胞ROS水平,增加其对顺铂敏感性,使其增殖受抑,细胞周期呈现DNA合成期(S)、合成后期(G2)/有丝分裂期(M)阻滞,凋亡率升高.[结论]ASTⅣ具有逆转白血病耐药的功效,可能与p62-Nrf2通路调控相关,但细胞最终命运受多条通路共同调控仍需探讨.
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