【摘 要】
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为构建表达猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）GP5重组牛痘病毒,本研究通过RT-PCR获得PRRSVCH-1a株GP5蛋白基因,将其克隆至pMD18-T载体。经测序鉴定正确后,将该片段作为目的基因亚
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／农业部兽医公共卫生重点开放实验室,延边大学农学院,中国农业科学院上海兽医研究所
【基金项目】
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国家863计划（2006AA10A203）,黑龙江省自然科学基金重点项目（ZJN-0602-01）
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为构建表达猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）GP5重组牛痘病毒,本研究通过RT-PCR获得PRRSVCH-1a株GP5蛋白基因,将其克隆至pMD18-T载体。经测序鉴定正确后,将该片段作为目的基因亚克隆至转移质粒pSC11中,构建重组转移质粒（pSC11-GP5）。将pSC11-GP5转染WR株牛痘病毒感染的TK-143细胞,与牛痘病毒进行同源重组。在含有X-gal的琼脂培养基上进行蓝斑筛选,获得了含有PRRSV GP5基因的重组病毒（rWR-PRRSV-GP5）。IFA及动物试验表明,重组病毒表达了P
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