副结核分枝杆菌DNA探针的制备与应用

来源 :中国兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yiqikeren

【摘要】

：

以溶菌酶、ＳＤＳ、高氯酸钠等处理提取副结核分析杆菌Ｃ２株染色体ＤＮＡ，经限制性内切酶ＰｓｔＩ消化后，以质粒ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ为载体，通过Ｔ４ＤＮＡ连接酶连接，转入Ｅ。ｃｏｌｉＤＨ５ａ受体菌中，构建了副结核菌Ｃ２株的ＤＮＡ基因文库。应用反向杂交试

【作者】

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刘思国刘清何陈奖励李卯年何昭阳

【机构】

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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,吉林农业大学动物科学系

【出处】

：

中国兽医学报

【发表日期】

：

1996年1期

【关键词】

：

核酸探针副结核菌 ELISA 病原细菌 nucleic acid probeMycobacterium paratuberculosisELISA*Facul

【基金项目】

：

吉林省科委资助项目

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以溶菌酶、ＳＤＳ、高氯酸钠等处理提取副结核分析杆菌Ｃ２株染色体ＤＮＡ，经限制性内切酶ＰｓｔＩ消化后，以质粒ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ为载体，通过Ｔ４ＤＮＡ连接酶连接，转入Ｅ。ｃｏｌｉＤＨ５ａ受体菌中，构建了副结核菌Ｃ２株的ＤＮＡ基因文库。应用反向杂交试验，从基因文库中筛选出４个重组克隆：ＰＴＰ１２、ＰＴＰ１９、ＰＴＰ３８。对这４个重组克隆进行酶切、电泳分析，结果表明４个插入片段长度分别为：４

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