【摘 要】
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目的构建人正常肾组织的cDNA文库并鉴定文库质量.方法运用mRNA 5′末端的模板转换方法以powerscript 逆转录酶进行转录,在mRNA 的5′末端添加一段5′-oligo做为延伸后的模板,
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目的构建人正常肾组织的cDNA文库并鉴定文库质量.方法运用mRNA 5′末端的模板转换方法以powerscript 逆转录酶进行转录,在mRNA 的5′末端添加一段5′-oligo做为延伸后的模板,从而富集全长cDNAs.扩增后的cDNAs经sfiⅠ酶切、柱层析洗脱,重组于λTripIEx2载体并包装后,测定滴度、重组率,扩增文库.随机挑取8个噬菌斑行PCR反应扩增插入片段.结果构建的cDNA文库滴度为2.6×106pfu*mL-1, 重组率>95%, 扩增后滴度达9×1011p
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