Nurr1基因shRNA表达载体的构建及其鉴定

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目的构建针对小鼠核受体相关因子1(Nurrl)的短发夹RNA(shRNA)表达载体,为进一步体内外研究Nurrl基因的功能奠定基础。方法选择两段RNA干扰靶序列,在体外分别合成两段互补的寡核苷酸,退火后与线性化的pSilenCircle质粒连接、转化感受态细胞DH5α,扩增、纯化得到所需质粒,通过酶切后琼脂糖电泳以及基因测序鉴定其分子量及插入片段的序列。结果纯化质粒的大小为4.6kb,插入的寡核苷酸序列与设计的序列完全相符。结论成功构建了针对Nurrl基因的shRNA的表达载体。
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