论文部分内容阅读
目的:用基因工程技术在大肠杆菌中高效表达人CaM蛋白。方法:用PCR方法获得人钙调素基因Ⅲ(hCaMⅢcDNA),将其插入表达载体pBV200,构建重组表达质粒hCaMⅢ/pBV200,用酶切、DNA测序、PCR扩增鉴定阳性克隆。用CaCl2法转化大肠杆菌DH5α使其表达CaM蛋白。结果:阳性重组子在大肠杆菌DH5α中经温度诱导可高效表达CaM蛋白,经15%SDS-PAGE分析,可观察到一分子量与理论值相符(约17000)的诱导表达条带,其表达量占菌体蛋白总量的20%。进一步分析表达产物的性质表明,CaM