【摘 要】
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目的 建立食品中沙门氏菌、单核细胞增生李斯特菌和蜡样芽胞杆菌多重重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)快速检测方法.方法 选择沙门氏菌invA基因、单增李斯特菌hlyA基因和蜡样芽孢杆菌16SRNA序列为目标基因进行扩增,建立并优化多重RPA扩增体系和扩增条件;评价反应体系的特异性和灵敏度,并对人工污染食品样品和实际样品进行检测.结果 多重RPA反应体系能够在20 min完成3种目标基因的扩增,特异性强;对沙门氏菌、单增李斯特菌和蜡样芽孢杆菌的
【机 构】
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成都医学院公共卫生学院,成都 610500;成都市新都区疾病预防控制中心,成都 610500;成都市武侯区疾病预防控制中心,成都 610041
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目的 建立食品中沙门氏菌、单核细胞增生李斯特菌和蜡样芽胞杆菌多重重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)快速检测方法.方法 选择沙门氏菌invA基因、单增李斯特菌hlyA基因和蜡样芽孢杆菌16SRNA序列为目标基因进行扩增,建立并优化多重RPA扩增体系和扩增条件;评价反应体系的特异性和灵敏度,并对人工污染食品样品和实际样品进行检测.结果 多重RPA反应体系能够在20 min完成3种目标基因的扩增,特异性强;对沙门氏菌、单增李斯特菌和蜡样芽孢杆菌的灵敏度分别为2.70×105、1.30×105、1.44×104 CFU/mL,能够用于人工污染样品和实际样品的检测.结论 本研究建立的多重RPA等温扩增方法特异性强,操作快速、简单,可为食源性致病菌的快速检测提供新方向.
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