人载脂蛋白基因αpoAⅠ在毕赤氏酵母中的胞内表达

来源 :复旦学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：pau998

【摘要】

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将PCR扩增得到的αpoAⅠ基因片段插入胞内表达质粒pPIC3．5K，重组的pPIC3．5K-αpoAⅠ用BglⅡ酶切后，转化Pichia pastoris GS115菌株，筛选获得G418高抗性转化子，再通过PCR鉴定证实口

【作者】

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杨婷婷赵志安张彦宋大新

【机构】

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复旦大学生命科学学院

【出处】

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复旦学报：自然科学版

【发表日期】

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2004年6期

【关键词】

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表达质粒 ApoAⅠ 载脂蛋白基因人血浆再通诱导毕赤氏酵母转化子细胞裂解 human apolipoprotein AⅠ intracellula

【基金项目】

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复旦大学Med X基金重点资助项目,,上海市科学技术委员会资助项目(024319204)

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将PCR扩增得到的αpoAⅠ基因片段插入胞内表达质粒pPIC3．5K，重组的pPIC3．5K-αpoAⅠ用BglⅡ酶切后，转化Pichia pastoris GS115菌株，筛选获得G418高抗性转化子，再通过PCR鉴定证实口αpoAⅠ基因已整合到染色体上．其转化子经摇瓶发酵和甲醇诱导，收集细胞裂解后，用SDS-PAGE与Western blotting检测，证明胞内有明显的rApoAⅠ表达，其分子质量与人血浆提取的ApoAⅠ相同．

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