【摘 要】
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目的探讨Western Blot检测P-糖蛋白表达的实验优化条件。方法随机选择6只雄性SD大鼠,给予荭草花提取物0.4g/（kg·d）灌胃,连续灌胃6d。采用钙盐沉淀法提取6只大鼠肝微粒体,
【机 构】
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贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室,贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心
【基金项目】
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国家自然科学基金（81760699）, 贵阳市科技计划（联合基金）项目（[20161001]03）, 贵州省科学技术厅人才团队项目（黔科合平台人才[2016]5613/5677）
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目的探讨Western Blot检测P-糖蛋白表达的实验优化条件。方法随机选择6只雄性SD大鼠,给予荭草花提取物0.4g/（kg·d）灌胃,连续灌胃6d。采用钙盐沉淀法提取6只大鼠肝微粒体,利用BCA法进行蛋白定量后,制备蛋白上样样品。比较不同样品处理方法、转膜方法的检测效果。结果与高温变性相比,样品经室温变性上样可检测到目的条带。湿法电转法较半干法电转法转膜效果好,且湿转条件选择120V,2h较为好。结论样品室温变性处理、120V,2h的湿转转膜条件,是检测P-糖蛋白较优的Western Bl
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