【摘 要】
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利用毕赤酵母系统表达具有催化活性的丙型肝炎病毒(HCV)NS3蛋白酶.将PCR直接扩增的病毒NS3丝氨酸蛋白酶基因和重组的带有辅酶的单链NS3/NS4A蛋白酶基因,分别插入表达载体pPIC
【机 构】
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军事医学科学院基础医学研究所,军事医学科学院基础医学研究所,山东理工大学生命科学学院
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利用毕赤酵母系统表达具有催化活性的丙型肝炎病毒(HCV)NS3蛋白酶.将PCR直接扩增的病毒NS3丝氨酸蛋白酶基因和重组的带有辅酶的单链NS3/NS4A蛋白酶基因,分别插入表达载体pPICZαA的EcoRⅠ和XbaⅠ克隆位点,转化毕赤酵母GS115,可溶性表达NS3蛋白酶和单链NS3/4A蛋白酶;ELISA法测定表达蛋白酶的抗原性;原核高效表达载体pBVIL1表达酶切底物NS5A-B片段,体外与蛋白酶共同温育,SDS-PAGE鉴定蛋白酶催化活性.载体测序结果表明,重组载体pPICZαA/NS3和pPICZ
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