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目的：建立以高效液相色谱法测定尼尔雌醇阴道用凝胶剂中尼尔雌醇含量的方法。方法：色谱柱为Hypersil ODS，流动相为甲醇-水（80：20），检测波长为221nm，流速为1．0mL·min^-1，进样量为20μL。结果：尼尔雌醇检测浓度的线性范围为20．06-200．6μg·mL^-1（r=0．9999），最低检出限及最低定量限分别为3．41、5．92μg·mL^-1；平均回收率为100．8％，RSD=1．2％。结论：该方法操作简便，结果准确,可用于测定尼尔雌醇阴道用凝胶剂