【摘 要】
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目的构建表达HBsAg重组MVA病毒，鉴定其抗原性并探讨不同免疫策略对免疫效果的影响。方法通过基因克隆的方法构建携带目的基因的重组pSC11质粒，该重组质粒与MVA病毒共转染BHK-21细胞后，发生同源重组，经数轮蓝白斑筛选后，获得携带目的基因的重组病毒MVA-S。通过PCR和Western Blot鉴定目的基因的表达。分别采用单独免疫和联合免疫的策略免疫BALB/c小鼠，通过ELISpot检测细
【机 构】
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102206 北京，中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 传染病预防控制国家重点实验室,102206 北京，中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 传染病预防控制国家重点实验室,102206 北京，中国
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目的构建表达HBsAg重组MVA病毒，鉴定其抗原性并探讨不同免疫策略对免疫效果的影响。
方法通过基因克隆的方法构建携带目的基因的重组pSC11质粒，该重组质粒与MVA病毒共转染BHK-21细胞后，发生同源重组，经数轮蓝白斑筛选后，获得携带目的基因的重组病毒MVA-S。通过PCR和Western Blot鉴定目的基因的表达。分别采用单独免疫和联合免疫的策略免疫BALB/c小鼠，通过ELISpot检测细胞免疫水平。
结果PCR和Western Blot证实MVA-S携带目的基因并具有抗原性。ELISpot结果显示MVA-S能诱导小鼠产生特异性细胞免疫，MVA-S与DNA-S疫苗单独免疫效果无统计学差异；DNA-S疫苗和MVA-S联合免疫效果强于DNA-S疫苗单独免疫；等剂量DNA-S疫苗初始免疫，高剂量MVA-S加强免疫效果更强；2种DNA疫苗(pVR-S、pcDNA-S)分别初始免疫、等剂量MVA-S加强免疫，组间差异无统计学意义。
结论研究成功构建了表达目的基因的重组病毒MVA-S，该重组病毒可诱导小鼠产生特异性细胞免疫，联合免疫效果更强。
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