【摘 要】
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[目的]构建携带γ-干扰素基因(ifn-γ)的pIRES改进型黄色荧光蛋白载体(pIRES-EYFPIFN-γ),为γ-干扰素基因的体内外表达及蛋白定位提供理想的标记.[方法]根据已知γ-干扰素基
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[目的]构建携带γ-干扰素基因(ifn-γ)的pIRES改进型黄色荧光蛋白载体(pIRES-EYFPIFN-γ),为γ-干扰素基因的体内外表达及蛋白定位提供理想的标记.[方法]根据已知γ-干扰素基因序列,设计在目的片段两端分别带EcoRⅤ和NotⅠ酶切位点序列的2条引物,用PCR技术从质粒pcDNA3IFN-γ中扩增出ifn-γ(499 bp),PCR产物用EcoRⅤ和NotⅠ双酶切后回收纯化,定向克隆至商品质粒pIRES-EYFP,重组质粒pIRES-EYFPIFN-γ用限制性内切酶酶切和DNA序列分析
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