快捷的定点突变效率近100%的大引物PCR方法

来源 :生物化学与生物物理进展 | 被引量 : 0次 | 上传用户：dygaalove4390

【摘要】

：

报道了一种新的PCR突变方法,它不需要纯化大引物或设计特别的旁侧引物.利用一个诱变引物和两个测序引物(T_m≤58℃)作为旁侧引物.第一轮PCR产物12.5μl直接加入到50 μl的第

【作者】

：

谢振华史小军

【机构】

：

清华大学深圳研究生院,广东省生物化学重点实验室,深圳,518055清华大学深圳研究生院,生命科学与海洋高技术实验室,深圳,518055;

【出处】

：

生物化学与生物物理进展

【发表日期】

：

2009年11期

【关键词】

：

聚合酶链反应定点突变大引物

下载到本地 , 更方便阅读

下载此文赞助VIP

声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架

论文部分内容阅读

报道了一种新的PCR突变方法,它不需要纯化大引物或设计特别的旁侧引物.利用一个诱变引物和两个测序引物(T_m≤58℃)作为旁侧引物.第一轮PCR产物12.5μl直接加入到50 μl的第二轮PCR反应体系作为模板和大引物,在开始第二轮PCR反应时,增加在68℃退火温度下进行10个循环的不对称PCR,这一步骤大大提高了通过600 bp或800 bp大引物所导致的突变效率.结果表明,该方法的产物能够达到高保真、97%～98%的突变效率和高产率.

其他文献

论高校教师应具备的素质

高等院校主要是培养生产,建设,管理,服务第一线的高素质技能型人才,培养高素质人才需要高素质教师,教师高校教师必须改革传统教学观念,必须具备培养新型人才观,要探索、研究

期刊

professional qualityprofessional knowledgeprofessional competenceprofessional

电站锅炉喷水减温器常见失效形式及防范措施

通过列举电站锅炉喷水减温器的几种结构形式,阐述了其工作原理和特点,分析了其常见的失效形式,并提出了相应的检查方法和处理防范措施.

期刊

喷水减温器失效防范

各国二季度GDP出炉

本期关注国际局势不稳撼动原油价格自7月中旬到8月中旬的一个月时间来,国际油价似乎又经历了一个多事之秋,一系列的地缘政治、油田停产及恐怖袭击事件,使国际油价在70多美元

期刊

国际油价恐怖袭击事件原油价格国际局势地缘政治油田停产美元经历

谈体育舞蹈对学生素质的影响

体育舞蹈是体育和艺术高度结合的一种艺术形式，集体育、娱乐和艺术于一体，是社会文明发展进程中的有力推动因素，其内容丰富，涉及力学、心理学、美学、生理学、音乐学等学科，具有艺

期刊

体育舞蹈身体素质心理素质协调能力

PHC管桩施工技术在软基处理中的应用

【摘要】介绍了PHC管桩的施工专业性较强、工序较多，在施工过程中，应严格控制每道工序，确保PHC管桩施工的质量，建立健全各项管理制度，为PHC管桩的顺利施工打下坚实的基础，为同类工程的施工具有一定的参考意义。　　【关键词】PHC管桩;锤击沉桩;管桩填芯　　1、施工准备　　1.1技术准备　　在施工前，结合PHC管桩施工的技术特点，建立健全各项管理制度，配备满足现场管理需要的技术人员，做好现场施工轴线

期刊

PHC管桩锤击沉桩管桩填芯

浅谈高职艺术表演类学生学习能力的培养

本文浅谈了高职艺术表演类学生学习能力的培养，不但包括人们平常所理解的记忆力、观察力、思维力以及掌握好的学习方法等比较表面的工具性能力，而且包含了专注力、刻苦持久力、

期刊

高职学生艺术表演类学习能力

创新实践推动全国碳市场健康有序发展——专访深圳排放权交易所总裁葛兴安

抓机遇发电行业成全国碳市场建设突破口rn《中国电力企业管理》:目前深圳碳排放交易试点的交易情况如何?请介绍一下电力企业参与碳市场的整体情况.rn葛兴安:深圳一直走在我国

期刊

管状皮带输送机在煤矿生产中的应用

本文主要介绍了管状皮带输送机在凯川煤矿应用后带来的效率、环保、经济等多方面的成果.

期刊

管状皮带机优势特色

互联网催生旅游新职业

近年来,随着国家经济的发展和人民生活水平的不断提升,旅游市场的需求越来越旺盛,从事旅游业的人越来越多.根据国家旅游数据中心的测算,2017年我国国内旅游人数50亿人次,比20

期刊

浅谈机电专业电工电子技能模块教学

中等职业学校传统的教学模式已逐渐和现阶段社会的需求不相协调，模块化教学在当今职业学校中广泛实施，结合一定的实践经验，对中职机电专业的电工电子技能模块教学内容、教学特点

期刊

技能模块教学教学特点教学方法

快捷的定点突变效率近100%的大引物PCR方法

与本文相关的学术论文