番茄环纹斑点病毒（TZSV）实时荧光定量PCR检测方法的建立

来源 :山东农业科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lskiba

【摘要】

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本研究根据番茄环纹斑点病毒（Tomato zonate spot virus,TZSV）保守N基因（Gen Bank登录号：13YV639）设计一对特异性引物,通过优化反应条件和反应体系,构建了TZSV的SYBR Green RT-qPC

【作者】

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徐弢郑雪张晓林陈永对穆野陈勇郑宽瑜赵立华刘小

【机构】

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西南林业大学生命科学学院,云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所、云南省农业生物技术重点实验室、农业部西南作物基因资源与种质创制重点实验室,福建省农业科学院植物保护研究所

【出处】

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山东农业科学

【发表日期】

：

2017年7期

【关键词】

：

番茄环纹斑点病毒实时荧光定量PCR 检测方法 Tomato zonate spot virus Real-time fluorescence quantita

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目（31360430、31460461、31560499）, 云南省科技计划项目面上项目（2016FB063）, 云南省优势特色重点学科生物学一级学科建设项目（50097505）, 云南省中青年学术技术带头人后备人才项目（2015HB081）, 福建省农科院青年英才项目（YC2016-5）

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本研究根据番茄环纹斑点病毒（Tomato zonate spot virus,TZSV）保守N基因（Gen Bank登录号：13YV639）设计一对特异性引物,通过优化反应条件和反应体系,构建了TZSV的SYBR Green RT-qPCR检测方法。该方法稳定可靠,组内和组间的变异系数都小于2%;标准曲线的斜率和相关系数分别为-3.39和0.996,扩增效率为97.44%;最低能检测到1.07×10-4copies/μL的阳性质粒,灵敏度为常规PCR的1 000倍。同时利用构建的RT-qPCR方

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