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目的：通过构建抑制cyclin D1基因小发夹RNA（shRNA）真核表达载体系统，为肿瘤基因治疗提供实验依据。方法：利用基因重组技术构建靶向cyclin D1 RNA干扰（RNAi）表达质粒，双酶切鉴定电泳及测序分析构建的质粒是否成功；Western Blot分析转染前后K562细胞cyclin D1蛋白表达的变化。结果：体外合成的64个碱基成功插入到预计位点，并且与设计序列完全一致；Western Blot分析结果显示转染所构建的质粒能明显下调K562细胞cyclin D1基因表达。结论：质粒的成功构