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目的
评价Toll样受体4(TLR4)/NF-κB信号通路与丙泊酚抑制内毒素诱导大鼠肺泡巨噬细胞TNF-α释放的关系。
方法成年雄性SD大鼠，提取、培养肺泡巨噬细胞，接种于6孔板(1×106个/孔)和96孔板(1×104个/孔)。采用随机数字表法分为5组(n＝18)：对照组(C组)PBS继续培养；二甲基亚砜组(D组)加入二甲基亚砜，终浓度5 mg/ml；LPS组(L组)加入LPS，终浓度1 μg/ml；丙泊酚组(P组)加入丙泊酚，终浓度25 μmol/L(4.46 μg/ml)；LPS＋丙泊酚组(L＋P组)加入LPS和丙泊酚，终浓度分别为1 μg/ml和25 μmol/L(4.46 μg/ml)。培养或孵育24 h时，采用CCK-8法检测细胞活力，采用瑞氏染色观察细胞形态变化，采用ELISA法检测上清液TNF-α浓度，采用Western blot法检测TLR4表达和NF-κB活性。
结果与C组比较，L组、L＋P组细胞活力和上清液TNF-α浓度升高，TLR4表达上调，NF-κB活性增强(P<0.05)，D组和P组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)；与L组比较，L＋P组细胞活力和上清液TNF-α浓度降低，TLR4表达下调，NF-κB活性减弱(P<0.05)，细胞形态变化减轻，伸出的伪足数减少。
结论丙泊酚抑制内毒素诱导大鼠肺泡巨噬细胞TNF-α释放的机制与抑制TLR4/NF-κB信号通路激活有关。