【摘 要】
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目的探讨中药山茱萸的有效成分莫诺苷对大鼠局灶性脑缺血/再灌注后神经修复的作用,以及Wnt信号通路是否参与其调节神经发生过程.方法SD ♂大鼠制备大鼠大脑中动脉阻死模型(MCAO).缺血30rain后再灌注,造模成功者随机分为假手术组、模型组、莫诺苷低剂量组(30 mg·kg-1)、莫诺苷中剂量组(90 mg·kg-1)、莫诺苷高剂量组(270 mg·kg-1).术后当天和术后7d应用Ludmila
【机 构】
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首都医科大学宣武医院,北京市老年病医疗研究中心,北京100053
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目的探讨中药山茱萸的有效成分莫诺苷对大鼠局灶性脑缺血/再灌注后神经修复的作用,以及Wnt信号通路是否参与其调节神经发生过程.方法SD ♂大鼠制备大鼠大脑中动脉阻死模型(MCAO).缺血30rain后再灌注,造模成功者随机分为假手术组、模型组、莫诺苷低剂量组(30 mg·kg-1)、莫诺苷中剂量组(90 mg·kg-1)、莫诺苷高剂量组(270 mg·kg-1).术后当天和术后7d应用Ludmila Belayer评分法对大鼠进行行为学评分,观察莫诺苷对神经功能的改善作用.术后7d利用核磁共振成像检测莫诺苷对脑梗死体积的影响.免疫荧光法检测SVZ区神经干细胞的增殖情况.免疫组织化学法和免疫印迹法检测Wnt3a,β-catenin,GSK-3β,Tcf-4等的表达,观察莫诺苷对对Wnt信号通路以及相关促神经发生调控因子的调节作用.结果 (1) MCAO造模后7d,莫诺苷中、大剂量能明显改善局灶性脑缺血大鼠的神经功能(P <0.05,P<0.01,n≥11).(2)采用核磁共振3.0 Tesla成像系统,冠状面及矢状面T1和T2加权像扫描结果显示,和模型组相比,莫诺苷中,高剂量组能够明显减小梗死体积(P <0.05,P<0.01,n=8).(3)MCAO造模后7d,莫诺苷明显增加SVZ区Ki-67阳性细胞以及Nestin阳性细胞的数量,但莫诺苷对假手术组大鼠的细胞增殖没有促进作用.(4)IHC检测结果显示,MCAO造模后SVZ区β-catenin的阳性表达明显增加,提示Wnt通路可能参与脑缺血后的神经发生过程.免疫印迹检测Wnt通路蛋白的表达发现,虽然造模后7d模型组与假手术相比几种蛋白的表达没有显著性差异,给予莫诺苷能明显促进大鼠患侧皮层Wnt3a,β-catenin,Tcf-4的表达.(5)造模后1d和3d,WB检测患侧皮层Wnt3a的表达,结果显示造模后1d Wnt3a表达与假手术组有显著差异(P <0.05,n=3),但造模后3d该蛋白的表达已下降到正常水平.结论莫诺苷能促进局灶性脑缺血大鼠SVZ区神经干细胞增殖,缩小脑梗死体积,最终改善神经功能.脑缺血后1d内Wnt信号通路被激活,但莫诺苷可维持该信号通路的激活至少到缺血后7d,因此推测莫诺苷促进神经发生的机制可能与Wnt信号通路的激活有关.
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ue*M#’#dkB4##8#”专利申请号:00109“7公开号:1278062申请日:00.06.23公开日:00.12.27申请人地址:(100084川C京市海淀区清华园申请人:清华大学发明人:隋森芳文摘:本发明属于生物技
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