分段扩增法克隆大鼠5-脂肪氧合酶cDNA并鉴定其序列

来源 :中华老年心脑血管病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zhiyuanfengxiang

【摘要】

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目的5-脂肪氧合酶（5-LO）是炎性介质白三烯合成过程中的限速酶，本研究克隆大鼠5LO cDNA编码区，旨在为利用大鼠5-L0分析白三烯在血管壁炎症中的作用做准备。方法从SD大鼠胚肝中提取

【作者】

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董晓柯尊平王俊峰周明李军许海军谭利党书毅

【机构】

：

十堰市太和医院（湖北医药学院附属太和医院）心内科,湖北医药学院计算机实验教学中心

【出处】

：

中华老年心脑血管病杂志

【发表日期】

：

2016年3期

【关键词】

：

脂氧合酶 DNA 互补 RNA 信使质粒白三烯类克隆分子 lipoxygenase DNA complementary RNA messen

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目的5-脂肪氧合酶（5-LO）是炎性介质白三烯合成过程中的限速酶，本研究克隆大鼠5LO cDNA编码区，旨在为利用大鼠5-L0分析白三烯在血管壁炎症中的作用做准备。方法从SD大鼠胚肝中提取mRNA并逆转录成cDNA，找出5-LOcDNA中独特的内切酶位点，再设计2对引物，扩出都含此酶切位点的5-LOcDNA片段。用高保真酶分段扩增出2个5-LOcDNA片段，再正确拼接，克隆成功后酶切鉴定并测序。将获取的cDNA序列与NCBI和Ensembl数据库比较序列的差异。结果用Oligo（dT）和随机引物从SD大鼠

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