灰色链霉菌中乙酰木聚糖酯酶基因的克隆、表达及酶学性质研究

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根据GenBank数据库中已报道的灰色链霉菌(Streptomyces griseus)全基因组序列,分析得到假定的乙酰木聚糖酯酶基因序列并设计引物;利用分子克隆的方法得到该菌株基因组中乙酰木聚糖酯酶基因,并构建原核表达载体pET28a-Sgraxe,经IPTG诱导表达重组SgrAxe,Ni-NTA亲和层析法纯化该蛋白。结果显示,克隆得到乙酰木聚糖酯酶基因axe,其序列全长1008 bp,编码336个氨基酸。SDS-PAGE检测带有pET28a-Sgraxe转化菌株诱导表达产物相对分子量约为37 kD,与
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