【摘 要】
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目的：构建慢病毒干扰LSD1表达的载体并鉴定.方法：设计并合成3对针对LSD1基因的shRNA链,退火形成双链,与酶切的质粒连接,转化DH5a菌株,提取质粒,进行酶切鉴定和测序分析.脂质体
【机 构】
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中国医科大学附属第一医院肿瘤研究所二室,中国医科大学附属第一医院肿瘤内科
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目的：构建慢病毒干扰LSD1表达的载体并鉴定.方法：设计并合成3对针对LSD1基因的shRNA链,退火形成双链,与酶切的质粒连接,转化DH5a菌株,提取质粒,进行酶切鉴定和测序分析.脂质体法转染人胃癌MKN-28细胞,通过荧光倒置显微镜判定转染效率,并通过real time-PCR法检测细胞中LSD1基因的表达水平.结果：经酶切鉴定筛选出的重组质粒测序结果与目的序列相同,重组质粒构建成功;转染胃癌MKN-28细胞后,LSD1基因在mRNA水平的表达降低.结论：成功构建了靶向LSD1基因的shRNA慢病毒载
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