【摘 要】
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采用红麻黄化苗为试材,结合密度梯度离心和差速离心的方法提取线粒体DNA(mtDNA)以满足测序要求。结果表明,蔗糖密度梯度离心法比Percoll密度梯度离心法更适合于红麻线粒体的分
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采用红麻黄化苗为试材,结合密度梯度离心和差速离心的方法提取线粒体DNA(mtDNA)以满足测序要求。结果表明,蔗糖密度梯度离心法比Percoll密度梯度离心法更适合于红麻线粒体的分离。分离后的线粒体经DNaseI消化核DNA,并采用Jannus绿检测线粒体的完整性,SDS和蛋白酶K裂解线粒体,并用酚/氯仿抽提除去蛋白,乙醇沉淀得到线粒体DNA,再经RNaseA消化去除RNA。提取的mtDNA经1.0%琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计检测,并设计叶绿体和核特异性基因引物检测是否有污染存在。结果表明,此方法提取
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